流式细胞术( Flow cytometry，FCM)艾滋病检测CD4+T CD8+T淋巴细

流式细胞术( Flow cytometry，FCM)检测CD4+T CD8+T淋巴细胞

流式细胞术（FCM）是对细胞和微粒进行快速、灵活、定量分析分类的高精技术，它融合了激光、电子计算机、单克隆抗体、荧光素化学、细胞化学染色等技术的优点。其基本原理是以激光为光源，将被检细胞用荧光标记抗体结合后输人流式细胞仪，通过高速流动系统将细胞排列成行，逐个流经艾滋病检测区，当细胞从流动室喷嘴处流出时，超声振荡搅动液流，使液流断裂成一连串均匀的小滴，每内最多只含有1个细胞，细胞经荧光探针的光反应和标记物的光散射能力中获取信息，由光电倍增管接收并转化成脉冲信号，并进行增强，数据经电脑处理、分辨细胞的类型从而检测出各类淋巴胞。

其特点是：①测量速度快，每秒能测量数千或数万个细胞；②可把特定的细胞分离出来；③可同时进行多参数分析；④可以提供细胞群体的均值和分布情况。

应用流式细胞术艾滋病检测CD4、CD8淋巴细胞，可分为多平台法和单平台法。多平台法应用三级程序艾滋病检测全血中的CD4+T细胞的绝对水平，CD4+T细胞的计数包括3个步骤：白细胞计数，确定白细胞中的淋巴细胞百分比及确定淋巴细胞中的CD4+T细胞百分比。将白细胞计数仪上得到的淋巴细胞绝对数乘以流式细胞仪上得到的CD4百分数，得到的CD4绝对数，产生误差的可能性为13%(CD4<200个/ul)和19%（CD4>200个/ul)。

BD公司推出用流式细胞仪单平台检测CD4绝对数，配合全自动分析软件，将这种误差产生的可能性减小到最小，目前已成为AIDS研究中的标准方法。采用免洗试剂，操作简便，减少细胞丢失。MultiSET软件是全自动淋巴细胞免疫表型检测分析软件，对外周血直接多色荧光分析，获得关于外周血中淋巴细胞各类亚型细胞的信息，MultiSET软件自动做内参检查，可以发现标本在收集、保存或制备时可能出现的错误。

另外，MultiSET软件提供了ＴruC Control结果的Levey-Jennings统计，可以对农工商ＴruCOUNT绝对计数的质量控制结果做长期连续监控。应用ＴruCOUNT管可同时进行相对计数和绝对计数。

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