诊断HIV抗体检测筛查的方法

一、HIV抗体筛查试验

HIV抗体的筛查检测包括HIV抗体检测的酶联免疫吸附试验( ELISA)、化学发光或免疫荧光试验和各种快速检测试验( RT)等。

（一）酶联免疫吸附试验( ELISA )

酶联免疫吸附试验是HIV抗体检测经典的、最常用的方法，这个方法的特点是易于掌握、判断结果有客观标准、价格低廉、适合于大批样本的检测。ELISA可使用血液、唾液、尿液样品，多为单纯HIV抗体检测试剂，另有第四代HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1 p24抗原和HIV抗体，缩短窗口期。

现今用于HIV抗体检测的ELISA试剂大多是双抗原夹心法，在固相载体上（微孑L板内表面）包被HJV抗原，样品中的HIV抗体与固相载体上的HIV抗原结合，形成抗原抗体复合物，加人酶标记的同一类HIV抗原分子，形成抗原-抗体-抗原的复合物。此复合物同底物发生酶催化显色反应，用酶标仪测定光密度值(OD值)，与临界值（Cut-off值）进行比较判定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。

（二）化学发光或免疫荧光试验

这类试剂采用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体。HIV抗原或抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶或荧光标记的HIV抗原或抗体，加发光或荧光底物，用发光或荧光仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。

（三）HIV抗体快速检测(RT)

这类试验简单快速，适用于应急检测、VCT门诊检测、医院门诊急诊检测、艾滋病检测点检测等。一般可在15-30 min内得出结果，大多仅利用自身试剂盒，不需要任何辅助试剂和仪器设备。

HIV抗体快速检测包括凝集试验、免疫渗滤试验和免疫层析试验。根据检测样本可分为血液快速检测和唾液快速检测。

1．明胶颗粒凝集试验( PA)：是HIV血清抗体检测的一种简便方法。将HIV抗原致敏的明胶颗粒作为载体，与待检样品作用。当待检样品含有HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情况判读结果。趴试剂有两种：同时检测HIV-1和HIV-2抗体以及分别检测HIV-1和HIV-2抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。

2．免疫渗滤试验（斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒快速试验）：均以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原点状固定在膜上，加待检样品。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。有效试验的质控点必须显色。

3．免疫层析试验：以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原线状固定在膜上，待检样品沿着固相载体迁移，阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带。有效试验的质控带必须显色。

4．唾液HIV抗体快速检测：原理为间接酶免疫法，在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIV gp41/gp36抗原，可同时检测唾液中的HIV-1/2抗体，使用收集口腔黏膜渗出液(OMT)的采集器可保护HIV体不受破坏。

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